瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染有什么區(qū)別
瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于,在瞬時轉(zhuǎn)染中,外源基因不整合到基因組中,而在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中,外源基因整合到基因組中。 此外,基因表達在瞬時轉(zhuǎn)染中發(fā)生的時間很短,而基因表達在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中發(fā)生較長的時間,因為外源基因經(jīng)過幾代。
瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外來遺傳元件轉(zhuǎn)染成真核細胞的兩種方法。一般來說,這兩種類型的轉(zhuǎn)染在生物技術(shù)中都有重要的應(yīng)用。
什么是瞬時轉(zhuǎn)染
瞬時轉(zhuǎn)染是一種轉(zhuǎn)染,其中外源基因進入細胞但不整合到基因組中。因此,外來基因不會在真核細胞內(nèi)進行復(fù)制。因此,它會隨著時間的推移而降解,同時通過細胞分裂稀釋。瞬態(tài)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要特征是它只允許短期基因表達。
圖1:GFP融合蛋白瞬時轉(zhuǎn)染到S2細胞中
此外,一般來說,用于轉(zhuǎn)染基因的載體也具有報告基因,可以監(jiān)測真核細胞內(nèi)外源基因的表達。此外,報告基因允許監(jiān)測細胞內(nèi)外源基因的存在。
什么是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類型的轉(zhuǎn)染,其中外源基因通過整合到染色體或染色體外表觀體中并入真核細胞的基因組。因此,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的主要特征是它允許外源基因代代相傳。此外,由于整合到基因組中,外源基因在細胞系內(nèi)持續(xù)更長的時間,從而產(chǎn)生“高而穩(wěn)定的基因表達。
圖2:穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
此外,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染中的整合構(gòu)建體包含可選擇的創(chuàng)客,以識別成功整合到基因組中的構(gòu)建體以及基因表達水平。
瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的相似性
瞬時和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是將外源基因引入真核細胞的兩種方法。 外源基因的表達發(fā)生在這兩種方法中。 此外,這些方法在生物技術(shù)中具有不同的應(yīng)用。
GFP在煙草葉片的瞬時表達(LUYOR-3415RG激發(fā)光源照射下發(fā)出綠色熒光)
瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的區(qū)別
瞬時轉(zhuǎn)染是指不參與將外源DNA整合到真核細胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法,而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指參與將外源DNA整合到真核細胞基因組中的轉(zhuǎn)染方法。 因此,這解釋了瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別。
檢測所需的時間:瞬時轉(zhuǎn)染檢測需要3-4周才能完成,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染需要12-18周才能完成。
遺傳變化:真核細胞中的瞬時轉(zhuǎn)染不會改變,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染會在真核細胞中產(chǎn)生性的遺傳變化。
傳給后代: 瞬時轉(zhuǎn)染不允許外源DNA代代傳遞,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許外源DNA代代相傳。
基因表達周期:瞬時轉(zhuǎn)染允許基因表達短時間長達24至96小時,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染允許基因表達更長的時間。
表達式級別:雖然瞬時轉(zhuǎn)染的表達水平相對較低,但穩(wěn)定轉(zhuǎn)染具有高而穩(wěn)定的表達。
成本:瞬態(tài)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的另一個區(qū)別是瞬時轉(zhuǎn)染相對便宜,而穩(wěn)定轉(zhuǎn)染昂貴。
應(yīng)用
瞬時轉(zhuǎn)染對于短期基因表達研究(包括小規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)和基因敲低測定)非常重要,而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染對于長期基因調(diào)控、大規(guī)模蛋白質(zhì)生產(chǎn)、穩(wěn)定細胞系的產(chǎn)生、基因治療等非常重要。
結(jié)論
簡而言之,瞬時轉(zhuǎn)染是一種外源基因不整合到真核細胞基因組中的轉(zhuǎn)染類型。因此,外來基因不會經(jīng)過幾代細胞。此外,這種類型的轉(zhuǎn)染僅允許在短時間內(nèi)表達外源基因。另一方面,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是另一種類型的轉(zhuǎn)染,其中外源基因整合到真核細胞的基因組中。因此,外源基因會經(jīng)過幾代細胞。此外,外源基因的表達發(fā)生在更長的時間內(nèi)。因此,瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染之間的主要區(qū)別在于將外源基因整合到真核細胞的基因組中。
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